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  链脲佐菌素 stz

 -------诱导大鼠糖尿病模型的最佳选择

 

关键字:Streptozocin  链脲佐菌素 stz  Streptozotocin  链脲霉素  糖尿病动物模型

STZ 诱发糖尿病动物模型的原理

       STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏,可造成1型糖尿病模型;而注射较少量STZ时,由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能,造成外周组织对胰岛素不敏感,同时给予高热量饲料喂养,两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类2型糖尿病的动物模型。

造模前的喂养

      Ⅰ型糖尿病模型成模比较快,通常大鼠在普通饲料适应性喂养2周后即可开始造模

      Ⅱ型糖尿病模型:高脂饮食诱导加小剂量STZ。造模前喂以高脂(高糖)饲料,诱发出胰岛素抵抗。

高脂(高糖)饲料

      高脂(高糖)饲料成分:其中含10%蔗糖,10%猪油,5%胆固醇

      由基础鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作高脂高糖饲料:其比例为猪油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黄3 % ,基础饲料59 %

预实验的重要性

      很重要。实验时STZ的给药量应参照预实验的结果,尽量不要盲目按照文献上或他人的给药量来直接使用,鼠均重和空腹(低糖状态)抗药力、禁食时长、注射选时、以及之前饲养过程、测糖选时等都不相同,通过预实验来确定符合自己实验鼠的给药计量,才是最科学的。

常用给药剂量

     Ⅰ型糖尿病模型:大鼠剂量为7065mg/Kg

     Ⅱ型糖尿病模型:高糖高脂喂养12 个月的大鼠,STZ 剂量在2540mg/Kg

     或参考文献(鼠均重不同,本剂量以200克均重为例)。

配置STZ溶液

      柠檬酸缓冲液的配制:

       (FW:210.14) 2.1g加入双蒸水100mL中配成A

      柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成B

      链脲佐菌素配制液:用时将AB液按一定比例混合(11.32也有按1:1的),PH计测定ph,调节ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。

      注射时用柠檬酸缓冲液以1%的浓度溶解STZ,按空腹体重注射相应的STZ  30分钟内注射完毕。注意: STZ容易失活, STZ快速称取后仍要求干燥避光,推荐用干燥铝箔(或锡箔)纸。

禁食和血糖的联系

      禁食12小时以上(一般过夜禁食,不禁水)。禁食的时间越长,STZ对胰岛β细胞的破坏力越明显,即药效越高。所以相对禁食时间延长,可以降低STZ的用量。

腹腔注射和尾部注射的区别

      尾部注射即静脉注射,药物利用率较高,同比腹腔注射,可以节省药量,缺点是操作起来不如腹腔注射方便。

注射前操作步骤

      过夜禁食后称重,按大鼠总重量比称取STZ,放一干燥灭菌瓶内,外用锡纸包好,将柠檬酸缓冲液及装STZ的瓶子置冰浴,一起带到动物房,如果注射操作技术不熟练,应两组交替注射,建议分组溶解STZ,比如10只或15只鼠/组。

注射时,推进速度和血糖的关系

      推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相对的危险性较低,但也不容易成模,常规操作中多要求快速注射。当然,STZ的剂量是决定血糖高低的主要因素。

死鼠问题的解决

      鼠的个体差别和空腹(低血糖)抵抗力的差异而致死亡率的不同,开始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不适应,或发生了DKA(即酮症酸中毒)

      首先,一定要保证足够的饮水量(饮水量不足容易导致死鼠);

      其次,高血糖和低血糖都会造成死鼠,避免死鼠可以通过注射胰岛素或暂时补糖,两种途径: 1、常见为血糖过高。补胰岛素法,补一些中效胰岛素。例如给诺和灵nNPH(中性鱼精蛋白锌胰岛素),每次2--3个单位,过了3-5天,大鼠一般死亡率就低了;2、补糖法,禁食后的鼠,注射的时候已经处于低血糖状态,造模4小时后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射时血糖过低死鼠;

再次,防止动物自相残杀。食物缺乏和供水不足的情况下,会互相撕杀、啃食同类,所以食物和饮水要供应充足,最好是两路供应;

最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,垫料潮湿,需要勤换垫料,所以糖尿病大鼠较其他大鼠容易出现感染,特别是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血测血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血测血糖后可用四环素(或金霉素眼药膏)局部涂抹处理伤口预防感染。

模型不达标者,三天后补注STZ(10mg-20mg/kg体重剂量腹腔注射),也很容易成模,或让血糖恢复正常后再常规剂量注射;但要达到理想的效果,往往是恢复到正常状态下重新造模。

STZ的保存方法

      20°C,干燥避光保存。(注:本品易潮解,如需反复取量过程中,应避免接触其受水受潮,受潮后30分钟后失效,这和注射时要求其快速注射是一个道理,即其水溶液不稳定)。

多次称取STZ时的操作方法和注意事项

如确实需要多次称取,要严格按照避免受潮的原则操作和存放。

操作方法

操作环境、盛装容器、分装工具都必须保证干燥。无需冰浴,分装后用封口膜密封瓶口,用铝箔纸(或锡箔,即避光)将瓶子包好,放入干燥罐里(干燥剂,即保持干燥状态), 并-20℃冷藏,可长期保存。本品保质期为2年半。

技术参数

      Product Name:Streptozocin,
     
≥75% α-anomer basis, ≥98% (HPLC), powder
      Product Number:S0130
      Product Brand:Sigma-Aldrich
      CAS Number:18883-66-4
      Molecular Formula:C8H15N3O7
      Molecular Weight:265.22 
      Storage Temp:-20°C
      APPEARANCE:WHITE TO LIGHT YELLOW POWDER
      SOLUBILITY:CLEAR YELLOW SOLUTION AT 50MG/ML OF WATER
      PROTON AND CARBON-13 NMR SPECTRA:CONSISTENT WITH STRUCTURE
      WATER BY KARL FISCHER:MAXIMUM 3.0%
      CARBON:35.9 TO 36.6% *
      NITROGEN:15.6 TO 16.2% *
      PURITY BY HPLC:98% MINIMUM
      ALPHA ANOMER BY HPLC:75% MINIMUM
      RECOMMENDED RETEST:3 YEARS 

 

订货指南:无菌避光棕色瓶包装

          产地:Sigma  货号:S0130 

          订任意包装,免费提供柠檬酸和柠檬酸钠!

          订购1g送100元手机充值卡,订购500mg送50元充值卡,累计赠送!

          活动截止时间为20131230日止

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名称

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S0130

Streptozocin 链脲佐菌素

Sigma

18883-66-4

100mg

¥491

¥280

>10

S0130

Streptozocin 链脲佐菌素

Sigma

18883-66-4

500mg

¥1,462

¥600

>6

S0130

Streptozocin 链脲佐菌素

Sigma

18883-66-4

1g

¥2,351

¥980

>12

02100557.1

Streptozocin 链脲佐菌素

Mpbio

18883-66-4

100mg

¥393

¥220

>30

0210055701

Streptozocin 链脲佐菌素

Mpbio

18883-66-4

1g

¥1,579

¥900

>56

 

全国服务电话:4006-111-883    021-34615995/021-34615975/021-34619803

 

常见问题:
       
STZ 诱发糖尿病动物模型的原理      造膜前的喂养                                     高脂(高糖)饲料                              预实验的重要性     
       
常用给药剂量                                      配置STZ                                          能否使用其他溶液配置缓冲液     禁食和血糖的联系   
       
腹腔注射和尾部注射的区别              注射前有那些操作步骤                     STZ的保存方法                              操作方法   
       
死鼠问题的解决                                 Specification Sheet                           STZ说明书下载

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