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IPTG

产品简介:
◆IPTG即Isopropyl
β-D-1-thiogalactopyranoside,也称Isopropyl
β-D-thiogalactoside,中文名为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。分子式为C9H18O5S ,分子量为238.30,CAS
Number 367-93-1,Ultra Pure,dioxane free,纯度>99.6%。我公司提供Merck公司该产品。
◆本产品为接近白色的粉末常用分子生物学试剂,常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ
基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用.
使用方法:
首先把IPTG配制成24 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100
ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100
mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X-gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
保存条件:粉末在-20℃稳定保存至少三年,具体请参考各个厂家提供的保存条件
注意事项 :
◆培养噬菌体时,Top agar中的添加量为:25 μl/3 ml(24 mg/ml)
◆含有IPTG的培养基4℃避光保存,须在1~2周内使用。
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